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     中耳炎是發(fā)生在中耳組織結構中的炎性病變，分為分泌性中耳炎、化膿性中耳炎、中耳膽脂瘤和特殊類型中耳炎4大類，該病不僅可導致注意力、認知感和聽力下降，還可引起顱內外并發(fā)癥進而危及生命^[1-3]。

     近年來，隨著臨床上糖皮質激素和廣譜抗菌藥物的普遍使用，條件致病菌感染率不斷增加，真菌檢出率逐漸升高，真菌性中耳炎逐漸走入大眾視野^[4]。

1.真菌性中耳炎

     真菌性中耳炎是以真菌為致病菌的中耳炎性疾病，《中耳炎臨床分類和手術分型指南（2012）》首次出現(xiàn)這一分類，并將其歸屬至特殊類型中耳炎^[3]。其與慢性化膿性中耳炎的臨床癥狀極其相似，常被誤診為普通細菌性中耳炎，對其進行抗生素治療，而廣譜抗生素會抑制細菌簇，使真菌迅速繁殖，加重病情，為臨床診治帶來困難^[5,6]。

2.造模方式

     SD大鼠50只，雌雄各半，隨機分為正常對照組、空白注射組、潮濕組、免疫抑制組和潮濕+免疫抑制組，每組10只。

     實驗開始1 ~ 3 d，潮濕組每日對大鼠右側耳部滴入2次0.9%氯化鈉注射液，免疫抑制組每日經口灌胃給予醋酸地塞米松藥液，潮濕+免疫抑制組每日對大鼠右側耳部滴入兩次0.9%氯化鈉注射液的同時每日經口灌胃給予醋酸地塞米松藥液。

     第4天，各組麻醉后，潮濕組、免疫抑制組和潮濕+免疫抑制組將1×1010 CFU/mL白色念珠菌懸液經鼓膜穿刺注入到大鼠右側中耳腔，每只50 μL，空白注射組大鼠注入等體積空白培養(yǎng)液，正常對照組不做任何處理；每日對潮濕組、潮濕+免疫抑制組大鼠右側耳部滴入2次0.9%氯化鈉注射液，連續(xù)觀察15天。

3.不同時間大鼠中耳白色念珠菌定植變化

     取大鼠耳道分泌物進行菌種培養(yǎng)并確認菌種定植，白色念球菌注入后的第5天、第10天、第15天，正常對照組和空白注射組大鼠耳道分泌物培養(yǎng)鑒定均無明顯菌落生長；潮濕組、免疫抑制組和潮濕+免疫抑制組的大鼠耳道分泌物經培養(yǎng)鑒定均為白色念珠菌且沒有發(fā)現(xiàn)其他菌落，培養(yǎng)的白色念珠菌呈呈乳白色，表面光滑有濃酵母氣味，形成菌落。

     大鼠耳道分泌物經過革蘭氏染色后，可見成群革蘭染色陽性的卵圓形孢子和假菌絲。如圖3所示，造模后的第5、10和15天中，潮濕+免疫抑制組大鼠耳道分泌物染色均出現(xiàn)白色念珠菌，且隨著時間的延長而增加；而免疫抑制組和潮濕組大鼠的耳道分泌物中均發(fā)現(xiàn)白色念珠菌，隨著時間延長，白色念球菌數(shù)量逐漸減少。

 （一般培養(yǎng)法）

（革蘭氏染色法）

4.不同時間大鼠大鼠中耳病理變化

     大鼠中耳HE染色結果所示，正常對照組和空白注射組大鼠在潮濕組（白念）大鼠中耳黏膜有充血、出血、水腫、少量炎性細胞浸潤現(xiàn)象；在免疫抑制組（白念）大鼠中耳出現(xiàn)黏膜充血、水腫、大量炎性細胞浸潤；在潮濕+免疫抑制組（白念）大鼠中耳黏膜充血、水腫、大量炎性細胞浸潤。

5.注意事項

     綜合實驗結果可清晰發(fā)現(xiàn)白色念珠菌在潮濕+免疫抑制條件下的模型建立方面效果更佳，提示兩方面因素：一方面是由于白色念珠菌屬于機會性和致病性真菌，在機體免疫功能低下時引起淺表感染和侵襲性感染的頻率更高；另一方面是由于白色念珠菌在干燥環(huán)境的存活率很差，而在潮濕環(huán)境中存活時間更長。

6.參考文獻

[1]Wald ER, DeMuri GP. Antibiotic recommendations for acute otitis media and acute bacterial sinusitis: conundrum no more [J]. Pediatr Infect Dis J, 2018, 37(12): 1255-1257.

[2]肖聰聰, 李博, 鄭體花, 等. 中耳炎小鼠模型的聽力學特點 [J]. 中國老年學雜志, 2019, 39(22): 5581-5585.

[3]孫建軍, 劉陽. 中耳炎臨床分類和手術分型指南(2012)解讀 [J]. 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志, 2013, 48(1): 5.

[4]周詳, 謝鼎俊, 姜順民, 等. 聚維酮碘治療化膿性中耳炎真菌感染及對聽力影響研究 [J]. 中華醫(yī)院感染學雜志, 2019, 29(14): 2194-2197, 2211.

[5]劉明賀. 真菌性中耳炎及相關變應原研究 [D]. 荊州: 長江大學; 2017.

[6]曾勇超. 真菌性中耳炎的發(fā)病危險因素分析與護理干預對策 [J]. 護理實踐與研究, 2019, 16(5): 97-98.