a欧美日韩高清在线播放-久久精品一区二区三区观看-日韩亚洲国产一二三区-国产又粗又硬又长又爽

1.概述

腎間質(zhì)纖維化（renal interstitial fibrosis，RIF）是各種原因的慢性腎臟疾病發(fā)展到后期的共同病理學(xué)表現(xiàn)，是造成慢性腎臟疾病的主要原因^[1]。目前研究認(rèn)為RIF病理過(guò)程是在炎癥、缺血、缺氧等因素作用下，成纖維細(xì)胞活化增殖，轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞并分泌Ⅰ型膠原，最終導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)在間質(zhì)內(nèi)過(guò)度沉積，使腎功能減退直至腎衰竭^[2]。腎間質(zhì)纖維化主要的病理特征有：肌成纖維細(xì)胞增殖和活化，細(xì)胞外基質(zhì)大量沉積，腎小管損傷和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)^[3-4]。

2.腎間質(zhì)纖維化的模型復(fù)制

單側(cè)輸尿管梗阻（Unilateral Uretera Obstruction，即UUO法）大鼠模型是經(jīng)典的腎間質(zhì)纖維化模型，通過(guò)結(jié)扎單側(cè)輸尿管引起腎血流動(dòng)力學(xué)和代謝的明顯改變，可在短期內(nèi)造成RIF的病理特點(diǎn)，十分接近人類RIF自發(fā)的病理過(guò)程^[2]。因此本研究通過(guò)結(jié)扎單側(cè)輸尿管，成功復(fù)制了腎間質(zhì)纖維化模型。

3.腎間質(zhì)纖維化模型的樣本采集及處理

對(duì)假手術(shù)組和模型組SD大鼠進(jìn)行解剖，取左側(cè)腎臟，于10%中性福爾馬林溶液固定，取材，包埋和切片，并分別進(jìn)行HE染色、Masson染色和免疫組化I型膠原染色。

4.腎間質(zhì)纖維化模型的病理學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

以送檢組織的不同形態(tài)學(xué)改變?yōu)榛A(chǔ)，建立了相關(guān)病理學(xué)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。其中HE染色的組織切片采用腎臟損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分。特殊染色組織切片采用image plus進(jìn)行光密度值計(jì)算觀察腎臟組織形態(tài)學(xué)變化，具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和面積計(jì)算方法如下：

HE染色評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：將腎臟組織病變分類，分別對(duì)各種類型病變進(jìn)行評(píng)分，對(duì)各類型得分及動(dòng)物總得分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。具體病變類型和病變程度及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)詳見(jiàn)表1。

Masson染色：以腎臟陽(yáng)性染色的面積占腎臟總面積百分比計(jì)算。半定量評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：0分：無(wú)陽(yáng)性；1分：1％～25％；2分：25％～50％；3分：50％～75％，4分：75％～100％。

5.腎間質(zhì)纖維化模型顯微鏡下觀察結(jié)果

HE染色結(jié)果：假手術(shù)組大鼠腎小管結(jié)構(gòu)排列整齊，腎小球形態(tài)規(guī)則，間質(zhì)正常，未見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。模型對(duì)照組大鼠可見(jiàn)腎小管變性、腎小管壞死，腎小管萎縮，腎間質(zhì)炎癥和腎間質(zhì)纖維化。

Masson染色結(jié)果：假手術(shù)組只在腎小管毛細(xì)血管周圍、系膜區(qū)及腎小球基底膜可見(jiàn)少量膠原；模型對(duì)照組大鼠腎臟間質(zhì)可見(jiàn)Masson陽(yáng)性染色，較假手術(shù)組有大量膠原形成，間質(zhì)增寬，纖維化成灶狀分布，腎間質(zhì)纖維化程度明顯加重。

I型膠原染色結(jié)果：假手術(shù)組只在血管周圍可見(jiàn)少量膠原；模型對(duì)照組大鼠腎臟間質(zhì)可見(jiàn)I型膠原陽(yáng)性染色，較假手術(shù)組腎間質(zhì)I型膠原沉積程度明顯加重。

6.參考文獻(xiàn)

[1] 吳君，荊雪寧，沈偉等. 五苓散通過(guò)TGF-β1/Smad通路抗大鼠腎間質(zhì)纖維化的機(jī)制研究[J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2022,33(05):607-615.

[2] 樓曉慧，南麗紅，彭衛(wèi)華等. 筋骨草總黃酮對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻模型大鼠腎間質(zhì)纖維化的抑制作用[J]. 福建中醫(yī)藥, 2022,53(06):34-37.

[3] 黃笛，張曉文，譚穎穎. 芪蛭真武湯改善單側(cè)輸尿管結(jié)扎模型大鼠腎間質(zhì)纖維化的實(shí)驗(yàn)研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2021,48(08):217-220+261-263.

[4] 高海洋，何海蘭，張立國(guó)，等. QDPR通過(guò)調(diào)控Beclin1改善UUO誘導(dǎo)的大鼠腎間質(zhì)纖維化[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2023,58(05):806-811..